高效液相色谱仪

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项目介绍

高效液相色谱仪(High-Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种广泛用于化学分析的仪器,它可以分离、检测和定量测量样品中的化合物。HPLC在化学、生物化学、制药学、环境科学等领域都有广泛的应用。以下是HPLC的主要特点和工作原理:

主要特点

  1. 高分辨率:HPLC能够提供很高的分辨能力,可以分离和检测样品中微量的化合物。
  2. 广泛的应用:HPLC可用于分析各种化合物,包括有机化合物、药物、生物分子、天然产物等。
  3. 高灵敏度:HPLC通常具有高灵敏度,可以检测到低至纳摩尔级别的物质。
  4. 定量分析:HPLC可用于定量分析,通过比较待测物的峰面积或峰高与标准品进行定量测量。
  5. 自动化:现代HPLC系统通常配备了自动进样、自动混合、自动数据采集和处理的功能,提高了分析效率。
  6. 选择性:通过选择适当的柱子、检测器和流动相,可以实现对不同性质的化合物的选择性分离。

工作原理

  1. 进样:样品通常以溶液形式引入HPLC系统,进样器会将样品注入到流动相中。
  2. 分离:样品混合物通过柱子(填充有固定相的管子)时,根据其相互作用与固定相和流动相的不同,分离成不同的成分。这是通过柱子内化学或物理相互作用实现的。
  3. 检测:分离后的化合物流出柱子并进入检测器,通常使用紫外可见光谱检测器。不同的检测器可以用于检测不同类型的化合物。
  4. 数据分析:通过记录检测器的信号,生成色谱图,其中峰的高度或面积与待测化合物的浓度成正比。这些数据可以用于定量分析。
取样要求
  1. 样品制备:样品必须在分析之前适当制备,通常包括将样品完全溶解在适当的溶剂中。确保样品溶解度和稳定性对于分析非常重要。
  2. 溶剂选择:选择与样品相容的溶剂,以确保样品在分析中不发生沉淀、凝固或反应。通常使用的溶剂包括水、乙腈、甲醇等。
  3. 溶液浓度:样品溶液的浓度应适中,通常在1到10毫摩尔/升之间。浓度过高可能导致色谱柱堵塞,而浓度过低可能会影响检测的灵敏度。
  4. 进样体积:进样的样品体积应在1到20微升之间,具体体积取决于检测器的灵敏度、柱子尺寸和样品浓度。
  5. 进样方式:通常有两种进样方式:自动进样和手动进样。自动进样通常更稳定和精确,但手动进样也可以用于少量样品。
  6. 进样器清洗:进样器需要定期清洗,以防止不同样品之间的交叉污染。
  7. 进样器冷却:对于温度敏感的样品,进样器可能需要进行冷却以防止样品分解。
  8. 标定曲线:对于定量分析,通常需要使用标定曲线,这要求使用标准物质制备一系列已知浓度的样品来建立曲线。
  9. 样品稳定性:样品的稳定性对于长时间的分析非常重要。避免长时间暴露在高温或紫外光下,这可能导致样品降解或变化。
  10. 数据记录:记录样品的详细信息,包括标识、浓度、采样时间等,以确保数据的可追溯性。
常见问题
  1. 峰形不对称:问题描述:峰形不对称可能会导致分析结果不准确。可能的原因:进样问题、流量不均匀、柱子老化等。解决方法:检查进样器、调整流量、更换柱子、确保柱子温度稳定。
  2. 噪声问题:问题描述:峰底出现噪声,可能会干扰峰的检测和识别。可能的原因:环境条件不稳定、检测器故障、进样问题等。解决方法:优化环境条件、检查检测器、维护进样系统。
  3. 基线漂移:问题描述:基线可能会漂移,导致难以准确识别和积分峰。可能的原因:进样器问题、流量不稳定、溶剂问题等。解决方法:检查进样器、调整流量、使用稳定的溶剂。
  4. 柱子堵塞:问题描述:柱子可能会堵塞,导致分析效率下降。可能的原因:样品残留、颗粒物污染、柱子老化等。解决方法:清洗柱子、使用样品前进行过滤、更换柱子。
  5. 流量问题:问题描述:流量不稳定可能会影响分析结果。可能的原因:流量控制器故障、气泡、泄漏等。解决方法:检查流量控制器、去除气泡、修复泄漏。
  6. 标定问题:问题描述:标定曲线不准确,导致定量分析不可靠。可能的原因:标准品制备问题、标定曲线不合适等。解决方法:重新制备标准品、优化标定曲线。
  7. 样品残留:问题描述:前一个样品可能会在下一个样品中残留,导致交叉污染。可能的原因:不充分冲洗进样器或柱子、样品制备问题。解决方法:充分冲洗进样器和柱子、适当制备样品。
  8. 检测器问题:问题描述:检测器可能出现故障或需要校准。可能的原因:灯泡老化、检测器设置不正确等。解决方法:更换灯泡、校准检测器。
服务优势

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